大鼠脊髓神經(jīng)元細胞

基本屬性：

細胞名稱：大鼠脊髓神經(jīng)元細胞 

組織來源：脊髓組織

商品貨號：LZ-YX9678

種屬來源：大鼠

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介：

大鼠脊髓神經(jīng)元細胞分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu)，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護；是源自腦的神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū)，主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡單反射的。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié)，31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元，即神經(jīng)細胞，其大小和外觀在神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體，內(nèi)含神經(jīng)絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示，在光鏡下是灰藍色斑塊狀，稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起，能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動，突起的大小和形態(tài)各不相同，很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓組織內(nèi)含有大量膠質(zhì)細胞，神經(jīng)元含量少，分離純化難度大，且脊髓神經(jīng)元細胞是高度分化的終末細胞，不能分裂增殖，培養(yǎng)要求高。剛接種的脊髓神經(jīng)元呈圓形，體積小，透亮，無突起。培養(yǎng)2-3d，可見胞體增大，突起增多延長；培養(yǎng)6-7d，細胞體大飽滿，突起明顯增加延長并交織成網(wǎng)，光暈明顯，立體感強。培養(yǎng)20d后，死亡細胞明顯增加，細胞出現(xiàn)內(nèi)空泡，突起粗細不均，甚至脫壁，發(fā)生細胞崩解。

培養(yǎng)基：含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：神經(jīng)元細胞樣

傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液：0.125%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

使用方法：

大鼠脊髓神經(jīng)元細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈神經(jīng)元細胞樣，在技術(shù)部標準操作流程下，細胞屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

大鼠脊髓神經(jīng)元規(guī)格3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。          

3.上海 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml完全培養(yǎng)基(補加1%FBS，促進貼壁)重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

大鼠脊髓神經(jīng)元品牌4)待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基(37℃預熱)。

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原代細胞試用的實驗類型：

前面我們了解了原代細胞獲取和培養(yǎng)過程中應該注意的一些細節(jié)，這有助于我們培養(yǎng)我們的原代細胞。那么原代細胞培養(yǎng)好后，它可適用哪些研究呢？

原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學、基因組學、細胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學研究等，還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應用中幾乎都涉及了幾個常見的且基礎(chǔ)的細胞實驗，如下：

一、細胞增殖檢測：

常見檢測方法：CCK8檢測法 ，MTT檢測法，Brdu檢測法，Edu檢測法，平板克隆形成

二、細胞周期檢測

常見檢測方法：流式檢測細胞周期，標記有絲分裂百分率法

三、細胞凋亡檢測

常見檢測方法：流式檢測細胞凋亡，線粒體膜電位，活性氧檢測，Hoechst染色，電鏡，TUNEL

四、細胞轉(zhuǎn)移能力檢測

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