線粒體蘋果酸脫氫酶（MDHm）試劑盒紫外分光光度法說明書

紫外分光光度法 50管/48樣   

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

產(chǎn)品名稱：線粒體蘋果酸脫氫酶（MDHm）試劑盒紫外分光光度法

貨號(hào)：LZ-S01148-A

規(guī)格 : 50管/48樣

測(cè)試方法:紫外分光光度法

產(chǎn)品分類：三羧酸循環(huán)系列

發(fā)貨地 ：上海

測(cè)定意義：

MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH，細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH，在真核細(xì)胞中，NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。

測(cè)定原理：

MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸，導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

試劑一：液體 50mL×1 瓶，-20℃保存；

試劑二：液體 10mL×1 瓶，-20℃保存；

試劑三：液體 1mL×1 支，-20℃保存；

試劑四、液體 50 mL×1 瓶，在 4℃保存；

試劑五、粉劑×2 支，-20℃保存；臨用前加入 300μL 蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑

分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

試劑六、粉劑×2 支，-20℃保存；臨用前加入 300μL 蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑

分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

樣本測(cè)定的準(zhǔn)備：

組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：

① 稱取約 0.1g 組織或收集 500 萬細(xì)胞，加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑三，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

② 將勻漿液于 600g，4℃離心 5min。

③ 棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，11000g，4℃離心 10min。

④ 上清液即胞漿提取物，可用于測(cè)定從線粒體泄漏的 MDH（此步可選做）。

⑤ 在步驟④中的沉淀中加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑三，超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復(fù) 30 次），用于線粒體 MDH 測(cè)定。

操作步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

公司正在出售的產(chǎn)品：

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NAALADL1重組人 NAALADL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

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LGALS1 Protein Human 重組人 Galectin-1 / LGALS1 蛋白

線粒體蘋果酸脫氫酶（MDHm）試劑盒紫外分光光度法小鼠肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒 ，英文名： MCT ELISA Kit

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Porcinetelomerase,TEELISA試劑盒豬端粒酶(TE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

生化檢測(cè)試劑盒常見問題：

在使用生化檢測(cè)試劑盒時(shí)，可能會(huì)遇到一系列常見問題，這些問題主要涉及到試劑盒的使用、保存、有效期、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面。廣州

以下是一些常見的問題及其解決方法：

一、?測(cè)定原理?：生化試劑盒通過化學(xué)反應(yīng)或酶促反應(yīng)測(cè)定樣本中物質(zhì)的含量或酶活性。常用的儀器包括分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀，它們的測(cè)定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水質(zhì)、動(dòng)植物組織、血清、細(xì)胞細(xì)菌、食品等樣本均可進(jìn)行測(cè)定?。

?二、選擇不同規(guī)格的試劑盒?：根據(jù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。如果實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀且具備檢測(cè)波長(zhǎng)，可以選擇微量法試劑盒；如果有分光光度計(jì)及相應(yīng)規(guī)格的比色皿，則可以選擇常量法或微量法試劑盒。建議購買前仔細(xì)閱讀說明書，確認(rèn)自備的儀器和試劑是否符合要求?。

?三、保存方法?：收到試劑盒后，如果暫時(shí)不用，應(yīng)按照外包裝上指示的溫度保存。拆開包裝后，應(yīng)按照每個(gè)試劑的保存溫度進(jìn)行保存，注意有些試劑忌反復(fù)凍融，有些粉劑溶解后性質(zhì)不穩(wěn)定?。

四、?有效期?：一般生化試劑盒的有效期為6個(gè)月，也有特殊貨號(hào)的有效期為1年。具體以實(shí)際收到貨物的標(biāo)簽信息為準(zhǔn)?1。

?五、樣本處理?：新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標(biāo)的測(cè)定，但有些生理活性物質(zhì)容易降解，建議使用新鮮樣本測(cè)定。對(duì)于冷凍樣本，建議在-70℃或液氮中保存。樣本在不同溫度下的保存時(shí)間有所不同，例如4℃可保存一周，-20℃保存一個(gè)月，-80℃保存3個(gè)月?。

?六、土壤酶活性測(cè)定?：對(duì)于土壤酶活性的測(cè)定，建議將鮮土風(fēng)干并過篩后取樣，以測(cè)定的重復(fù)性。若使用鮮土測(cè)定，需樣本的顆粒大小一致且水分含量相似?。

七、?預(yù)測(cè)定?：在進(jìn)行正式測(cè)定前，建議選擇2-3個(gè)預(yù)期結(jié)果差別較大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。通過預(yù)測(cè)定可以全面反映樣品特點(diǎn)、試劑質(zhì)量、儀器設(shè)備穩(wěn)定性和操作規(guī)范性，確保正式測(cè)定結(jié)果真實(shí)可靠?。

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  大鼠趨化因子(C-X-C基序)配體1(CXCL1)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：大鼠趨化因子,CXCL1抗體,單克隆抗體

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  豬腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：豬腫瘤壞死因子α,TNFa抗體,單克隆抗體

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  大鼠離子化鈣結(jié)合適配分子1(IBA1)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：大鼠離子化鈣結(jié)合,IBA1抗體,單克隆抗體

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  綿羊腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：綿羊腫瘤壞死因子,TNFa抗體,單克隆抗體

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  大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：大鼠紅細(xì)胞生成素,EPO抗體,單克隆抗體

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  3490元

  產(chǎn)品名：人趨化素(,CHEM抗體,單克隆抗體

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  大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：大鼠腦源性神經(jīng),BDNF抗體,單克隆抗體

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  豬堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：豬堿性成纖維細(xì)胞,FGF2抗體,單克隆抗體