RNA甲基化(m6A)共沉淀高通量測序(meRIP-seq)
產(chǎn)品別名 |
共沉淀高通量測序,RNA甲基化(m6A) |
面向地區(qū) |
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項(xiàng)目簡介:
RNA 甲基化指發(fā)生在RNA 分子上不同位置的甲基化修飾現(xiàn)象,常見的RNA轉(zhuǎn)錄后修飾方式有6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A) 和5-甲基胞嘧啶(C5-methylcytidine,m5C)等。
新研究發(fā)現(xiàn),m6A修飾在調(diào)控基因表達(dá)、剪接、RNA 編輯、RNA 穩(wěn)定性、控制mRNA壽命和降解、介導(dǎo)環(huán)狀RNA翻譯等方面扮演重要角色。因此meRIP-seq助力解決細(xì)胞分化,生物發(fā)育、疾病發(fā)展,熱休克反應(yīng)等生物學(xué)問題。
利用甲基化RNA共沉淀結(jié)合高通量測序 (Methylated RNA Immunoprecipitation sequening,MeRIP-seq)技術(shù),可以對RNA轉(zhuǎn)錄后甲基化修飾圖譜進(jìn)行全面研究,是表觀轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究的關(guān)鍵技術(shù)。
項(xiàng)目流程:
甲基化RNA共沉淀 (Methylated RNA Immunoprecipitation,MeRIP)基于抗體特異性結(jié)合甲基化修飾的堿基的原理,以RNA共沉淀富集甲基化修飾片段為基礎(chǔ),然后通過高通量測序,在全轉(zhuǎn)錄組范圍內(nèi)研究發(fā)生甲基化的RNA區(qū)域,獲得結(jié)果。
客戶提供:
1、活細(xì)胞:培養(yǎng)細(xì)胞至60-80%密度,然后加滿培養(yǎng)基寄給公司;
2、物種信息(人、大小鼠物種,其他物種需評估)
基本分析內(nèi)容:
1、 原始數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)
2、過濾后數(shù)據(jù)質(zhì)量QC 圖
3、測序序列與參考基因組比對
4、基因組覆蓋度分布
5、Peak Calling 分析
6、Peak 可視化
7、Peak 統(tǒng)計(jì)分析
8、m6A 的基本特征
8.1 peak 在基因元件的分布
8.2 reads 在基因元件的分布
8.3 Peak 關(guān)聯(lián)基因的特征
9、差異peak 分析
10、 motif分析
分析內(nèi)容:
環(huán)狀RNA關(guān)聯(lián)分析
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參考文獻(xiàn):
X, et al.N6-methyladenosine-dependent regulation of messenger RNA stability.Nature. 2014;505(7481):117-20.
2.Liu N, et al.N(6)-methyladenosine-dependent RNA structural switches regulate RNA-protein interactions.Nature. 2015;518(7540):560-4.
3.Yang Y, Fan X, Mao M, et al. Extensive translation of circular RNAs driven by N6-methyladenosine[J]. Cell Research, 2017.
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