Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法說(shuō)明書(shū)

可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣 

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

產(chǎn)品名稱：Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)：LZ-S01130-A

規(guī)格 : 50管/24樣

測(cè)試方法:可見(jiàn)分光光度法

產(chǎn)品分類：氧化磷酸化系列

發(fā)貨地：上海

測(cè)定意義：

Ca++ Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中，可催化ATP水解生成ADP和無(wú)機(jī)磷。

測(cè)定原理：

根據(jù)Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無(wú)機(jī)磷，通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量來(lái)確定ATP酶活性高低。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液： 液體 50mL ×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 10mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體 5mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體 5ml×1 瓶，4℃保存。

試劑四：粉劑×3 支，-20℃保存。用時(shí)每支加 1mL 蒸餾水，現(xiàn)用現(xiàn)配；用不完的試劑分裝

后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

試劑五：液體 5mL×1 瓶，4℃保存。

試劑六：粉劑×1 瓶，4℃保存。用時(shí)加入 3mL 蒸餾水， 4℃保存。

試劑七：粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時(shí)加入 25mL 蒸餾水，溶解后 4℃保存一周。

試劑八：粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時(shí)加入 25mL 蒸餾水，溶解后 4℃保存一周。

試劑九：液體 25mL×1 瓶，室溫保存。

試劑十：10mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液 10mL×1 瓶，4℃保存。

NAD+和 NADH 的提?。?/span>

1 血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（mL）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 酸性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。NADH 的提?。喊凑昭澹{）體積（mL）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 堿性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2 組織中 NAD+和 NADH 的提?。篘AD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g組織，加入 1mL 酸性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。NADH 的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g組織，加入 1mL 堿性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3 細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提?。篘AD+的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：酸性提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 酸性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。NADH 的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：堿性提取液體積（mL）500~1000：1的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 堿性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

操作步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

生化檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題：

在使用生化檢測(cè)試劑盒時(shí)，可能會(huì)遇到一系列常見(jiàn)問(wèn)題，這些問(wèn)題主要涉及到試劑盒的使用、保存、有效期、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面。以下是一些常見(jiàn)的問(wèn)題及其解決方法：

一、?測(cè)定原理?：生化試劑盒通過(guò)化學(xué)反應(yīng)或酶促反應(yīng)測(cè)定樣本中物質(zhì)的含量或酶活性。常用的儀器包括分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀，它們的測(cè)定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水質(zhì)、動(dòng)植物組織、血清、細(xì)胞細(xì)菌、食品等樣本均可進(jìn)行測(cè)定?。

?二、選擇不同規(guī)格的試劑盒?：根據(jù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。如果實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀且具備檢測(cè)波長(zhǎng)，可以選擇微量法試劑盒；如果有分光光度計(jì)及相應(yīng)規(guī)格的比色皿，則可以選擇常量法或微量法試劑盒。建議購(gòu)買前仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，確認(rèn)自備的儀器和試劑是否符合要求?。

?三、保存方法?：收到試劑盒后，如果暫時(shí)不用，應(yīng)按照外包裝上指示的溫度保存。拆開(kāi)包裝后，應(yīng)按照每個(gè)試劑的保存溫度進(jìn)行保存，注意有些試劑忌反復(fù)凍融，有些粉劑溶解后性質(zhì)不穩(wěn)定?。

四、?有效期?：一般生化試劑盒的有效期為6個(gè)月，也有特殊貨號(hào)的有效期為1年。具體以實(shí)際收到貨物的標(biāo)簽信息為準(zhǔn)?1。

?五、樣本處理?：新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標(biāo)的測(cè)定，但有些生理活性物質(zhì)容易降解，建議使用新鮮樣本測(cè)定。對(duì)于冷凍樣本，建議在-70℃或液氮中保存。樣本在不同溫度下的保存時(shí)間有所不同，例如4℃可保存一周，-20℃保存一個(gè)月，-80℃保存3個(gè)月?。

?六、土壤酶活性測(cè)定?：對(duì)于土壤酶活性的測(cè)定，建議將鮮土風(fēng)干并過(guò)篩后取樣，以測(cè)定的重復(fù)性。若使用鮮土測(cè)定，需樣本的顆粒大小一致且水分含量相似?。

七、?預(yù)測(cè)定?：在進(jìn)行正式測(cè)定前，建議選擇2-3個(gè)預(yù)期結(jié)果差別較大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。通過(guò)預(yù)測(cè)定可以全面反映樣品特點(diǎn)、試劑質(zhì)量、儀器設(shè)備穩(wěn)定性和操作規(guī)范性，確保正式測(cè)定結(jié)果真實(shí)可靠?。

公司正在出售的產(chǎn)品：

ABCA1(ATP binding cassette transporter A1 0.5mgABCA1(ATP binding cassette transporter A1) 腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗原

COQ7 Protein Human 重組人 COQ7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CCL6重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GDNF Protein Rat 重組大鼠 GDNF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PDGFRA重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒 ，英文名： fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit

雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA檢測(cè)試劑盒Chicken17-ketosteroids,17-KSELISAKit 96T/48T

人5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗體(IgG)試劑盒 Human 5HT IgG ELISA Kit

英文名稱MouseIL-1ELISAKit小鼠白介素1(IL-1)規(guī)格：96T/48T

冰凍切片組織CDK3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次

RatCollageypeⅢ,ColⅢELISA試劑盒大鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PLAT重組小鼠 tPA / PLAT 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

蛋白Z(PROZ)重組蛋白 Recombinant Protein Z (PROZ)

EPDR1重組人 EPDR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

COQ7 Protein Human 重組人 COQ7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL6 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IL6 / Interleukin-6 蛋白

Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法小鼠高半胱酸(Hcy)ELISA試劑盒 ，英文名： Hcy ELISA Kit

大鼠N端前腦素(-proBNP)ELISA檢測(cè)試劑盒RatN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 96T/48T

人白介素4(IL-4)試劑盒 Human IL-4 ELISA KIT

UlexEuropaeusagglinin,UEAELISAKit荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PAR-1蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25次

Porcineniicoxide,NOELISA試劑盒豬(NO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T